Астрономия и микроскопия

Форум сайта "Два Стрельца"
Текущее время: 25 апр 2024, 09:39

Часовой пояс: UTC + 3 часа




Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 7277 ]  На страницу Пред.  1 ... 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342 ... 486  След.
Автор Сообщение
СообщениеДобавлено: 11 апр 2019, 10:59 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 07 ноя 2016, 07:18
Сообщения: 1667
adam писал(а):
Размечтались :D , органеллы у дрожжей Вам подавай. :lol:
...
Органеллы дрожжей и с зубодробительными методиками(фиксацией, обработкой кислотой и т.д.) - хрен окрашиваются :D( в немецком микрокосмосе есть мудрёная методика выяления ядер), а с люминесцентными красителями и подавно органеллы не выявятся.

Кстати о ядрах. Интересно было бы посмотреть с бромистым этидием.

_________________
Микмед-6 вар. 74., Микмед-2 вар. 11.


Вернуться к началу
 Профиль  
 

СообщениеДобавлено: 11 апр 2019, 14:24 
Не в сети

Зарегистрирован: 28 ноя 2009, 20:24
Сообщения: 1114
Откуда: Омск
alex_klepnev писал(а):
Пекарские дрожжи. Люминесценция. Окраска калькофлюор белый.
[/url]


Откуда такой дефицитный и дорогой краситель? :D
Позаимствовали у тех, кто занимается конфокальной микроскопией?

_________________
Мой блог: http://microcosmos555.blogspot.ru/


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 11 апр 2019, 18:42 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 01 июн 2014, 15:25
Сообщения: 674
Откуда: Москва
Aktis писал(а):
alex_klepnev писал(а):
Пекарские дрожжи. Люминесценция. Окраска калькофлюор белый.
[/url]


Откуда такой дефицитный и дорогой краситель? :D
Позаимствовали у тех, кто занимается конфокальной микроскопией?

Все гараздо проще. На eBay купил. 1500 за флакон.

_________________
Люмам Р-8, МИН-8, Polyvar MET, DIC PZO, КФ-4, GAMMA Hungary, Phv, ОИ-13, ОИ-14, микротом МПС-2.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 11 апр 2019, 18:44 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 01 июн 2014, 15:25
Сообщения: 674
Откуда: Москва
adam писал(а):
Solar писал(а):
Прикольно. У некоторых (из слабее окрашенных, "живых") заметны неоднородности в окраске. Может быть стоит попробовать меньшие концентрации красителя, чтобы уменьшить сплошное окрашивание, и тогда проявятся органеллы?

Размечтались :D , органеллы у дрожжей Вам подавай. :lol:
Дрожжи Общая характеристика
Цитата:
Клеточная стенка (оболочка) дрожжей слоиста, в состав ее у большинства дрожжей входят в основном (до 60—70% сухой массы) гемицеллюлозы; в небольших количествах — белки, липиды, хитин. У некоторых дрожжей оболочка может в той или иной степени ослизняться, вследствие чего клетки склеиваются друг с другом и при развитии в жидких средах образуют оседающие на дно сосуда хлопья.

Органеллы дрожжей и с зубодробительными методиками(фиксацией, обработкой кислотой и т.д.) - хрен окрашиваются :D( в немецком микрокосмосе есть мудрёная методика выяления ядер), а с люминесцентными красителями и подавно органеллы не выявятся.

А в чем причина такой сложности? Клеточная стенка не пропускает красители?

_________________
Люмам Р-8, МИН-8, Polyvar MET, DIC PZO, КФ-4, GAMMA Hungary, Phv, ОИ-13, ОИ-14, микротом МПС-2.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 11 апр 2019, 23:32 
Не в сети

Зарегистрирован: 06 окт 2013, 18:17
Сообщения: 1153
alex_klepnev писал(а):
adam писал(а):
Solar писал(а):
Прикольно. У некоторых (из слабее окрашенных, "живых") заметны неоднородности в окраске. Может быть стоит попробовать меньшие концентрации красителя, чтобы уменьшить сплошное окрашивание, и тогда проявятся органеллы?

Размечтались :D , органеллы у дрожжей Вам подавай. :lol:
Дрожжи Общая характеристика
Цитата:
Клеточная стенка (оболочка) дрожжей слоиста, в состав ее у большинства дрожжей входят в основном (до 60—70% сухой массы) гемицеллюлозы; в небольших количествах — белки, липиды, хитин. У некоторых дрожжей оболочка может в той или иной степени ослизняться, вследствие чего клетки склеиваются друг с другом и при развитии в жидких средах образуют оседающие на дно сосуда хлопья.

Органеллы дрожжей и с зубодробительными методиками(фиксацией, обработкой кислотой и т.д.) - хрен окрашиваются :D( в немецком микрокосмосе есть мудрёная методика выяления ядер), а с люминесцентными красителями и подавно органеллы не выявятся.

А в чем причина такой сложности? Клеточная стенка не пропускает красители?

Сложность - в особой прочности клеточной стенки у дрожжей, причём, мёртвые дрожжевые клетки всего лишь лучше окрашиваются основными красителями. А для исследования органелл у дрожжей применяется даже метод физического разрушения дрожжевых клеток с металлическими шариками :D с последующим центрифугированием (ультрацентрифуга :D ) митохондриальной фракции.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 12 апр 2019, 01:53 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 07 ноя 2016, 07:18
Сообщения: 1667
Не... Так не интересно. Хотелось бы порассматривать органеллы в неразрушенных клетках :)

_________________
Микмед-6 вар. 74., Микмед-2 вар. 11.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 17:18 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 20 мар 2017, 15:18
Сообщения: 1622
Всё не могу нарадоваться на киносъёмочный объектив Ломо ОКС1-40-1 ))
Я не так много уделяю внимания визуальным наблюдениям, мне предпочтительнее фотосъёмка, но вот с этим объективом очень хочется поделиться и тем, как он хорош в визуале.
Применяю его реверсно на микроскопе МББ-1А, к оправе передней линзы приклеен переходник м26 на RMS. Увеличение при визуале получается +- как с Ломо План 3,5х0.10, единственно, желательно чуть поджать диафрагму (т.е. запас по разрешению у объектива ещё есть, с ним можно спокойно снимать до 5:1 на кропе - падения качества к краям незаметно, а дифракционный предел достигается примерно при масштабе около 6:1).
И при таком раскладе, рабочее расстояние составляет примерно 41мм. - красота! Эх, лет десять назад эти объективы можно было купить за сущие копейки, сейчас они распробованы и стоимость редко бывает ниже 200$((
Цветопередача при том хороша, у него довольно приличное просветление, и на мой взгляд даже получше, чем на ОКС1-22-1, а там оно тоже весьма вменяемое. Аберрации очень хорошо исправлены, чтобы заметить хроматику и то в зоне нерезкости, надо светить под очень острым углом к плоскости кадра падающим светом, при том в основном ХА в виде блёклой "зелени" (что, говорят, характерно для киносъёмочных объективов) а маджента проблем практически вовсе не создаёт.

Попробовал тут продолжить свои изыскания в плане склейки HDR - снял этим объективом в масштабе 4:1 речной песок, склейка из 6-ти кадров с разной экспозицией, склейки по фокусу не делалось:

ИзображениеRiver sand. Macro 4:1. HDR


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 20:50 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 25 мар 2014, 18:06
Сообщения: 989
Откуда: Москва, Кунцево. Корытово(по выходным)
Да, снимок хорош. У меня есть ОКС1-25-1 2,5/25. Надо с ним позаниматься. Интересна история его появления у меня. Лет пять назад, проходил на работе мимо контейнера и увидел в нём металлические чемоданчики. Посмотрел один, оказался аппаратом для чтения микрофш. На месте оптику не обнаружил, видно было только мощный осветитель. Взял один, на всякий случай, дня через два разобрал, не без труда и обнаружил два объектива, ОКС и Юпитер 8. в отличном состоянии, поскольку добраться до них ручёнками пользователей было просто невозможно. Правда только линзблоки, но с диафрагмой. Юпитер8 пока лежит, к нему переходник надо делать, а мастерскую мою разгромили. Успел сделать только переходник для ОКС. Теперь жалею, что сразу не разобрал, иначе перетащил бы в кабинет с десяток и добывал бы оптику потихоньку. Когда освобождали здание под реконструкцию, много техники с оптикой пошло в металлолом. Кое, что удалось выковырнуть, но многое прошло и мимо, за всем не уследишь. Теперь технику обновили и выбрасывать будут не скоро. :(


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 21:09 
Не в сети

Зарегистрирован: 16 окт 2014, 14:21
Сообщения: 2047
А мне не нравится. Мыла слишком много.

_________________
http://radiopicture.listbb.ru/index.php


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 21:54 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 04 июн 2014, 13:21
Сообщения: 1728
Откуда: Беларусь. Минск
Здесь я согласен, что боке в этом снимке несколько не в тему. Но понимаю, что он для демонстрации другого, а именно, HDR. В остальном хорошо, отличный цвет. Думаю, что HDR здесь не оправдан, без него можно всё вытянуть. Блики всё равно провалены. Мне кажется, лучший результат по ДД можно получить, используя полярики. Сам всё никак не соберусь поснимать в поляризованном отражённом свете, ума не приложу, как приделать полярик на кольцевой осветитель :(


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 22:48 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 20 мар 2017, 15:18
Сообщения: 1622
Спасибо за комментарии, оценку и критику!
Да, боке тут не в тему, но рельеф объекта превышает ГРИП, так что это естественно при данном масштабе съёмки, не делая стэкинг.
При таком размере зёрен песка надо по-хорошему либо масштаб другой брать, либо делать стэкинг - это я ещё самые крупные зёрна (как и самые мелкие) отсортировал\убрал, в принципе для меня не новость выбирать +- подходящую фракцию отмучиванием, как делают с абразивами, но тут возиться было неохота, да и стэкинг делать тоже. А попробовать на таком объекте HDR было любопытно.
Поляризацию с кольцевым тоже хочу попробовать, но пока тоже не придумалось как это реализовать..


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 13 апр 2019, 23:43 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 25 мар 2014, 18:06
Сообщения: 989
Откуда: Москва, Кунцево. Корытово(по выходным)
Сделал фото не совсем через микроскоп. но объективом ОКС1-25-1 2,5/25. Фрагмент двухкопеечной монеты 1980-го года. Стек из 3-х кадров. И для масштаба фрагмент линейки. Фото сделано на самодельном штативе с макромехом. Как нибудь выложу его фото.



Масштаб by Анатолий Крылов, on FlickrИзображение
[url][url=https://flic.kr/p/2eqoMQf]Изображение[/url]


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 14 апр 2019, 02:08 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 01 июн 2014, 15:25
Сообщения: 674
Откуда: Москва
Пришла весна и появились первые цветы. А с ними и пыльца. Можно начинать собирать коллекцию.
Мать и мачеха.
Автофлуоресценция. Микроскоп Люмам Р-8, возбуждающий фильтр - УФ, голубая светоделительная пластина.
Объектив ЛОМО Л АПО ВИ 60х1.0. Мультифокусный стекинг.

Изображение

Изображение

Изображение

_________________
Люмам Р-8, МИН-8, Polyvar MET, DIC PZO, КФ-4, GAMMA Hungary, Phv, ОИ-13, ОИ-14, микротом МПС-2.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 14 апр 2019, 11:15 
Не в сети

Зарегистрирован: 10 янв 2017, 12:53
Сообщения: 4022
Откуда: Харьков
С ВИ 60 как смотрите, в капле дистиллированной воды? На предметном стекле как-то фиксированы (в смысле закреплены, а не препараторском:))?

_________________
МБИ-3, МБИ-11, МБС-1, Микмед-2, Микмед-5, Zeiss Nf/ЛОМО, PZO Biolar PI


Вернуться к началу
 Профиль  
 
СообщениеДобавлено: 14 апр 2019, 14:31 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 01 июн 2014, 15:25
Сообщения: 674
Откуда: Москва
amphicyon писал(а):
С ВИ 60 как смотрите, в капле дистиллированной воды? На предметном стекле как-то фиксированы (в смысле закреплены, а не препараторском:))?


Наношу раствор с пыльцой на стекло. Даю высохнуть. После этого караю каплю дистиллированной воды и смотрю.

_________________
Люмам Р-8, МИН-8, Polyvar MET, DIC PZO, КФ-4, GAMMA Hungary, Phv, ОИ-13, ОИ-14, микротом МПС-2.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
Показать сообщения за:  Поле сортировки  
Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 7277 ]  На страницу Пред.  1 ... 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342 ... 486  След.

Часовой пояс: UTC + 3 часа


Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и гости: 248


Вы не можете начинать темы
Вы не можете отвечать на сообщения
Вы не можете редактировать свои сообщения
Вы не можете удалять свои сообщения
Вы не можете добавлять вложения

Найти:
Перейти:  
Создано на основе phpBB® Forum Software © phpBB Group
Русская поддержка phpBB
Яндекс.Метрика