Дмитр писал(а):
Есть ли методика какая по идентификации биологических объектов именно по их изображениям в поляризованном свете?
Нет такой методики, да и не нужно. Биологические объекты очень разные и к ним необходимо применять разнообразные методы контрастирования. Всё зависит от объекта и поставленных задач.
Дмитр писал(а):
И ещё, может ли в таком случае поляризация заменить, например, фазовый контраст?
Ни в коем случае!
Дмитр писал(а):
Вообще с недоверием отношусь к фазовому контрасту, особенно положительному (кф4, например), считаю этот метод «вчерашним днём» реально «убивающим» разрешение на микроскопе. Мб кто поможет разобраться в его прелестях и преимуществах перед другими методами контрастирования?
Дмитрий, чтобы оценить плюсы, минусы и прелесть применения фазового контраста при изучении некоторых объектов, надо поработать с фазовым контрастом.
Фазовый контраст ОСОБЕННО пригоден при изучении живых биологических объектов: бактерии, простейшие, микроводоросли и т.п.
В последние годы я всегда начинаю свою работу по изучению биологических объектов в капле воды, использую фазовый контраст. Это значительно облегчает поиск тех или иных объектов, глаза не устают, как это бывает при светлом поле. А затем уже от поставленных задач могу менять методы контрастирования.
И ещё. Если при съёмках объектов
с амплитудной модуляцией стоит задача достижения хорошего разрешения при работе в светлом поле, то надо использовать объективы с высокой числовой апертурой. Если же этот способ использовать для объектов
с фазовой модуляцией, то получим изображение со слабым контрастом по краю...
Поэтому для объектов с фазовой модуляцией лучше использовать фазовый контраст! В этом случае можно получить чёткие картинки или чёткие очертания как включений, так и органелл у объектов.
Приведу в качестве примера своё фото, хотя это объект не с фазовой модуляцией (пояснение внизу фото):
Вложение:
Комментарий к файлу: Closterium, PHV
IMG_1481_1000cs.jpg [ 118.1 КБ | Просмотров: 18128 ]
Какие плюсы при использовании фазового контраста в данном примере? Пожалуйста:
1. очень хорошо различимы кристаллики гипса на концах клетки - мелкие синие точки. Количество этих кристалликов важно при определении клостериума до вида. Также при съёмках на видео хорошо просматривается броуновское движение этих кристалликов.
2. очень хорошо видна граница концевых вакуолей клетки (области синего цвета на верхушках клетки). Так легче произвести измерения границ вакуолей, чем это делать в светлом поле.
3. Хорошо видно количество и получены чёткие очертания пиреноидов (жёлтые кружочки). Количество пиреноидов также необходимо для определения вида. С светлом поле пиреноиды сливаются с зелёным хроматофором, их сложнее измерить и т.д.
У других видов клостериумов (это десмидиевые микроводоросли) с применением фазового контраста хорошо различимы поры.
Можно ещё много привести примеров, но надо ли?
Кстати, фазовый контраст также применяется при изучении полированных шлифов образцов горных пород и металлов, но в отражённом свете. В этом случае можно наблюдать и выявлять различие в изменении фаз в отдельных участках шлифа. На картинке это выглядит как полосы, которые могут быть не видны при скрещенных поляризаторах.
Фазовый контраст (проходящий свет) можно применять для обнаружения свилей в линзах и т.д.
Просто у многих сложилось мнение, что фазовый контраст необходим только для изучения бактерий...Это не так.
Наверняка многие даже и не слышали, что можно ОДНОВРЕМЕННО применять и такие экзотические методы контрастирования: фазовый контраст плюс скрещенные поляризаторы.
Вход
Регистрация
FAQ
Поиск
Случайно не Генкал?