Астрономия и микроскопия

Форум сайта "Два Стрельца"
Текущее время: 28 мар 2024, 22:09

Часовой пояс: UTC + 3 часа




Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 43 ]  На страницу Пред.  1, 2, 3
Автор Сообщение
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 07 апр 2012, 13:37 
Не в сети

Зарегистрирован: 17 фев 2012, 13:44
Сообщения: 60
Можно ли окрашивать грамоположительных бактерий анилиновыми красителями?


Вернуться к началу
 Профиль  
 

 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 07 апр 2012, 14:36 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 11 мар 2009, 11:12
Сообщения: 901
Откуда: Россия, г. Москва
Alex писал(а):
Можно ли окрашивать грамположительных бактерий анилиновыми красителями?

вот книга о красителях http://labx.narod.ru/BOOKS_FILES_PDF/DNA_stain_book.pdf
анилиновые краски-это общее название

_________________
мой сайт http://labx.narod.ru/
Polyvar, Zeiss Imager Z1, Jenaval, Микротом Reichert Jung Biocut 2030, К.М.Н. 14.03.02


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 21 янв 2013, 07:08 
Не в сети

Зарегистрирован: 17 фев 2012, 13:44
Сообщения: 60
Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат?


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 21 янв 2013, 10:45 
Не в сети

Зарегистрирован: 03 сен 2012, 23:14
Сообщения: 2215
Откуда: Ростов
Alex писал(а):
Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат?

Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п.

_________________
Биолам Р11 с АПО и УФ объективами с СТ11, КФ-1 и КФ-4, Гамма 3D, АУ-26, Laboval 4 с Phv ахроматами, Peraval interphako, MB30 с ДИК и ФК KFZ (частично KFA и KFS), Биомед с набором ПЛАН ФК, Jenamed 2 с ФК


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 21 янв 2013, 11:42 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 11 мар 2009, 11:12
Сообщения: 901
Откуда: Россия, г. Москва
Alex писал(а):
Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат?


вы бы написали, что хотите наблюдать?
единственное что приходит на ум из доступного:
наибольшее распространение в качестве люминесцентной метки кальция в последнее время получил антибиотик тетрациклин. Способность тетрациклина образовывать с
кальцием хеллат[304] была использована для разработки методов исследования кальция не только в минерализованных тканях[305, 306], но и в различных клетках[307] и их органоидах[308-311].

304. Regna P.В., Solomons I. A., Murai К., Timureck E., Brunnings K.J., Lazier N.A. The isolation and
general properties of terramycin and terramcin-sults.– J. Amer. Chem. Soc., 1951, v. 73, 4211.
305. Milch R.А., ТоbiеJ.E., Robinson R.A. A microscopic study of tetracycline localization in sceletal
neoplasms.– J. Histochem. and Cytochem., 1961, v. 9, 261.
306. Frost H.M., Villanueva S.R., Roth H. Tetracycline staining of newly forming bone and mineralizing
cartilage in vivo.– Stain Technol., 1960, v. 35, 135.
307. Tapp E., Kovacs К., Carrol R. Tetracyclin staining of tissues in vitro.–Stain Technol., 1966, 40, 199.
308. Du Buy H.G., Showacre J.L. Selective localization of tetracycline in mitochondria of living cells.–
Science, 1961, v. 133, 196.
309. Caswell А.H., Hutchison J.D. Visualization of membrane bound cations by a fluorescent technique.–
Biochem. and Biophys. Res. Communs, 1971, v. 42, №1, 43-49.
310. Caswell A.H. The migration of divalent cation in mitochondria visualized by a fluorescent chelate
probe.– J. Membr. Biol., 1972, v. 7, №4, 345–346.
311. Popov P.G., Vartzarova К.J., Kossekova G.P., Nikolov T.K. Fluorimetric study of tetracyclines – a new
class of fluorescent probes.– Biochem. Pharmacol., 1972, v. 21, №17, 2363–2372.




Животным вводили сначала ализариновый красныйS, через неделю- окситетрациклинb еще через неделю- флуорексон.
По прошествий недели после введения флуорексона изготавливали препараты костей и их люминесценцию исследовали микроскопически.
В результате такой обработки вокруг гаверсовых полостей кости образовывались концентрические зоны разного цвета люминесценции. Наиболее удаленная от гаверсова канала область обладала красной люминесценцией ализарина, далее следовала область золотисто-желтой люминесценции окситетрациклина и непосредственно к гаверсовой полости примыкало кольцо зелёной люминесценции флуорексона. Эта работа представляет собой пример изящного применения трехцветного люминесцентного метода, позволяющего легко проследить направление и скорость минерализации кости.
Одним из важнейших и наиболее трудных вопросов, возникающих при попытке использовать люминесцентные, красители-метки для изучения функциональных механизмов клетки является вопрос о природе субстрата, связывающего люминесцентную метку. Большая сложность и многокомпонентность клетки, наличие в ней взаимодействующих структурных органоидов, имеющих зачастую сходные механизмы действия, не позволяют использовать непосредственно представления о взаимодействии метки с какими-либо чистыми веществамиin vitro для интерпретации данных, полученных при исследовании клетки.

_________________
мой сайт http://labx.narod.ru/
Polyvar, Zeiss Imager Z1, Jenaval, Микротом Reichert Jung Biocut 2030, К.М.Н. 14.03.02


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 22 янв 2013, 09:25 
Не в сети

Зарегистрирован: 17 фев 2012, 13:44
Сообщения: 60
Цитата:
Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п.

хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители.


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 22 янв 2013, 12:43 
Не в сети

Зарегистрирован: 03 сен 2012, 23:14
Сообщения: 2215
Откуда: Ростов
Для любителя наблюдение бактерий в УФ-свете - экзотика. :-) Если наблюдать люминисценцию на обычном микроскопе, то есть риск пожечь глаза.

_________________
Биолам Р11 с АПО и УФ объективами с СТ11, КФ-1 и КФ-4, Гамма 3D, АУ-26, Laboval 4 с Phv ахроматами, Peraval interphako, MB30 с ДИК и ФК KFZ (частично KFA и KFS), Биомед с набором ПЛАН ФК, Jenamed 2 с ФК


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 22 янв 2013, 14:35 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Alex писал(а):
хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители.

Если не секрет, можно ли поделиться с сообществом такой информацией:
1) Чем вызвана необходимость (или желание) наблюдений бактерий в коротковолновом свете?
2) Что Вы имеете ввиду под "коротковолновым светом" (диапазон длин волн)?
3) Интересует ли Вас вполне определенный вид бактерий?
4) Вы планируете наблюдать фиксированные препараты, или бактерии "живьем" (краситель должен быть витальным, бактерии должны быть устойчивы к УФ на длине волны возбуждения люминесценции)?
5) Есть ли у Вас предположение, ЧТО ИМЕННО Вы увидите в ходе своих наблюдений, каков будет результат?
6) Что Вы планируете использовать для наблюдений: какой микроскоп, источник возбуждения, светофильтры?

Чем точнее Вы опишите свою задачу, тем больше вероятность, что Вы получите дельный совет.


Последний раз редактировалось Сэм-59 22 янв 2013, 14:43, всего редактировалось 1 раз.

Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 22 янв 2013, 14:43 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 11 мар 2009, 11:12
Сообщения: 901
Откуда: Россия, г. Москва
Alex писал(а):
Цитата:
Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п.

хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители.


http://www.fsvok.ru/downloads/c7m7i88/uch._pos._lum._mikroskopia_v2.pdf
если в Москве, могу подарить немного акридинового оранжевого

_________________
мой сайт http://labx.narod.ru/
Polyvar, Zeiss Imager Z1, Jenaval, Микротом Reichert Jung Biocut 2030, К.М.Н. 14.03.02


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 02 фев 2013, 12:09 
Не в сети

Зарегистрирован: 17 фев 2012, 13:44
Сообщения: 60
В качестве коротковолнового осветителя применяю сине-фиолетовый сетодиод (длинна волны 400-450нм.). Перед окуляром устанавливаю жёлтый светофильт. При коротковолновом освещении повышается разрешающая способность т.е. хорошее качество изображения. А при люминисценции ещё лучше. :D Растворил флюорохромовую пасту в спирте. Буду пробовать окрашивать. :wink:


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 02 фев 2013, 14:59 
Не в сети

Зарегистрирован: 03 сен 2012, 23:14
Сообщения: 2215
Откуда: Ростов
Что будете окрашивать?

_________________
Биолам Р11 с АПО и УФ объективами с СТ11, КФ-1 и КФ-4, Гамма 3D, АУ-26, Laboval 4 с Phv ахроматами, Peraval interphako, MB30 с ДИК и ФК KFZ (частично KFA и KFS), Биомед с набором ПЛАН ФК, Jenamed 2 с ФК


Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 02 фев 2013, 18:22 
Не в сети

Зарегистрирован: 17 фев 2012, 13:44
Сообщения: 60
Хочу окрашивать бактерии.
Вроде окрасил, но почему-то плоховато получается.


Вложения:
оло.jpg
оло.jpg [ 28.34 КБ | Просмотров: 9363 ]
Вернуться к началу
 Профиль  
 
 Заголовок сообщения: Re: Красители дома
СообщениеДобавлено: 03 фев 2013, 11:39 
Не в сети
Аватара пользователя

Зарегистрирован: 05 дек 2012, 22:15
Сообщения: 751
Откуда: Одесса
Alex писал(а):
В качестве коротковолнового осветителя применяю сине-фиолетовый сетодиод (длинна волны 400-450нм.). Перед окуляром устанавливаю жёлтый светофильт.
.........
Вроде окрасил, но почему-то плоховато получается


Светофильтр должен отсечь длину волны возбуждения, но пропустить все более длинноволновое излучение. Вы знаете полосу пропускания вашего светофильтра, он не валит полезный сигнал? Можете проверить здесь: http://www.elektrosteklo.ru/Color_Glass ... ttance.pdf


Вернуться к началу
 Профиль  
 
Показать сообщения за:  Поле сортировки  
Начать новую тему Ответить на тему  [ Сообщений: 43 ]  На страницу Пред.  1, 2, 3

Часовой пояс: UTC + 3 часа


Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: А.Н.Крылов, Google [Bot], Microbiologist, ИНО и гости: 75


Вы не можете начинать темы
Вы не можете отвечать на сообщения
Вы не можете редактировать свои сообщения
Вы не можете удалять свои сообщения
Вы не можете добавлять вложения

Найти:
Перейти:  
Создано на основе phpBB® Forum Software © phpBB Group
Русская поддержка phpBB
Яндекс.Метрика