Для любителя наблюдение бактерий в УФ-свете - экзотика.
Если наблюдать люминисценцию на обычном микроскопе, то есть риск пожечь глаза.
| Астрономия и микроскопия http://forum.shvedun.ru/ |
|
| Красители дома http://forum.shvedun.ru/viewtopic.php?f=6&t=372 |
Страница 3 из 3 |
| Автор: | Alex [ 07 апр 2012, 13:37 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Можно ли окрашивать грамоположительных бактерий анилиновыми красителями? |
|
| Автор: | Юрий [ 07 апр 2012, 14:36 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): Можно ли окрашивать грамположительных бактерий анилиновыми красителями? вот книга о красителях http://labx.narod.ru/BOOKS_FILES_PDF/DNA_stain_book.pdf анилиновые краски-это общее название |
|
| Автор: | Alex [ 21 янв 2013, 07:08 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат? |
|
| Автор: | Юрий_Тк [ 21 янв 2013, 10:45 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат? Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п. |
|
| Автор: | Юрий [ 21 янв 2013, 11:42 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): Подскажите пожалуйста, какими подручными люминесцентными веществами можно окрашивать препарат? вы бы написали, что хотите наблюдать? единственное что приходит на ум из доступного: наибольшее распространение в качестве люминесцентной метки кальция в последнее время получил антибиотик тетрациклин. Способность тетрациклина образовывать с кальцием хеллат[304] была использована для разработки методов исследования кальция не только в минерализованных тканях[305, 306], но и в различных клетках[307] и их органоидах[308-311]. 304. Regna P.В., Solomons I. A., Murai К., Timureck E., Brunnings K.J., Lazier N.A. The isolation and general properties of terramycin and terramcin-sults.– J. Amer. Chem. Soc., 1951, v. 73, 4211. 305. Milch R.А., ТоbiеJ.E., Robinson R.A. A microscopic study of tetracycline localization in sceletal neoplasms.– J. Histochem. and Cytochem., 1961, v. 9, 261. 306. Frost H.M., Villanueva S.R., Roth H. Tetracycline staining of newly forming bone and mineralizing cartilage in vivo.– Stain Technol., 1960, v. 35, 135. 307. Tapp E., Kovacs К., Carrol R. Tetracyclin staining of tissues in vitro.–Stain Technol., 1966, 40, 199. 308. Du Buy H.G., Showacre J.L. Selective localization of tetracycline in mitochondria of living cells.– Science, 1961, v. 133, 196. 309. Caswell А.H., Hutchison J.D. Visualization of membrane bound cations by a fluorescent technique.– Biochem. and Biophys. Res. Communs, 1971, v. 42, №1, 43-49. 310. Caswell A.H. The migration of divalent cation in mitochondria visualized by a fluorescent chelate probe.– J. Membr. Biol., 1972, v. 7, №4, 345–346. 311. Popov P.G., Vartzarova К.J., Kossekova G.P., Nikolov T.K. Fluorimetric study of tetracyclines – a new class of fluorescent probes.– Biochem. Pharmacol., 1972, v. 21, №17, 2363–2372. Животным вводили сначала ализариновый красныйS, через неделю- окситетрациклинb еще через неделю- флуорексон. По прошествий недели после введения флуорексона изготавливали препараты костей и их люминесценцию исследовали микроскопически. В результате такой обработки вокруг гаверсовых полостей кости образовывались концентрические зоны разного цвета люминесценции. Наиболее удаленная от гаверсова канала область обладала красной люминесценцией ализарина, далее следовала область золотисто-желтой люминесценции окситетрациклина и непосредственно к гаверсовой полости примыкало кольцо зелёной люминесценции флуорексона. Эта работа представляет собой пример изящного применения трехцветного люминесцентного метода, позволяющего легко проследить направление и скорость минерализации кости. Одним из важнейших и наиболее трудных вопросов, возникающих при попытке использовать люминесцентные, красители-метки для изучения функциональных механизмов клетки является вопрос о природе субстрата, связывающего люминесцентную метку. Большая сложность и многокомпонентность клетки, наличие в ней взаимодействующих структурных органоидов, имеющих зачастую сходные механизмы действия, не позволяют использовать непосредственно представления о взаимодействии метки с какими-либо чистыми веществамиin vitro для интерпретации данных, полученных при исследовании клетки. |
|
| Автор: | Alex [ 22 янв 2013, 09:25 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Цитата: Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п. хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители.
|
|
| Автор: | Юрий_Тк [ 22 янв 2013, 12:43 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Для любителя наблюдение бактерий в УФ-свете - экзотика. Если наблюдать люминисценцию на обычном микроскопе, то есть риск пожечь глаза.
|
|
| Автор: | Сэм-59 [ 22 янв 2013, 14:35 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители. Если не секрет, можно ли поделиться с сообществом такой информацией: 1) Чем вызвана необходимость (или желание) наблюдений бактерий в коротковолновом свете? 2) Что Вы имеете ввиду под "коротковолновым светом" (диапазон длин волн)? 3) Интересует ли Вас вполне определенный вид бактерий? 4) Вы планируете наблюдать фиксированные препараты, или бактерии "живьем" (краситель должен быть витальным, бактерии должны быть устойчивы к УФ на длине волны возбуждения люминесценции)? 5) Есть ли у Вас предположение, ЧТО ИМЕННО Вы увидите в ходе своих наблюдений, каков будет результат? 6) Что Вы планируете использовать для наблюдений: какой микроскоп, источник возбуждения, светофильтры? Чем точнее Вы опишите свою задачу, тем больше вероятность, что Вы получите дельный совет. |
|
| Автор: | Юрий [ 22 янв 2013, 14:43 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): Цитата: Зачем именно люминесцентные красители? Обычно применяют фуксин, генцианвиолет и т.п. хочу попробовать наблюдать бактерии в коротковолновом свете. Чтобы хорошо было видно, надо чтоб была вторичная люминисценция.А для этого нужны специальные красители.http://www.fsvok.ru/downloads/c7m7i88/uch._pos._lum._mikroskopia_v2.pdf если в Москве, могу подарить немного акридинового оранжевого |
|
| Автор: | Alex [ 02 фев 2013, 12:09 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
В качестве коротковолнового осветителя применяю сине-фиолетовый сетодиод (длинна волны 400-450нм.). Перед окуляром устанавливаю жёлтый светофильт. При коротковолновом освещении повышается разрешающая способность т.е. хорошее качество изображения. А при люминисценции ещё лучше.  Растворил флюорохромовую пасту в спирте. Буду пробовать окрашивать. 
|
|
| Автор: | Юрий_Тк [ 02 фев 2013, 14:59 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Что будете окрашивать? |
|
| Автор: | Alex [ 02 фев 2013, 18:22 ] | ||
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома | ||
Хочу окрашивать бактерии. Вроде окрасил, но почему-то плоховато получается.
|
|||
| Автор: | Сэм-59 [ 03 фев 2013, 11:39 ] |
| Заголовок сообщения: | Re: Красители дома |
Alex писал(а): В качестве коротковолнового осветителя применяю сине-фиолетовый сетодиод (длинна волны 400-450нм.). Перед окуляром устанавливаю жёлтый светофильт. ......... Вроде окрасил, но почему-то плоховато получается Светофильтр должен отсечь длину волны возбуждения, но пропустить все более длинноволновое излучение. Вы знаете полосу пропускания вашего светофильтра, он не валит полезный сигнал? Можете проверить здесь: http://www.elektrosteklo.ru/Color_Glass ... ttance.pdf |
|
| Страница 3 из 3 | Часовой пояс: UTC + 3 часа |
| Powered by phpBB® Forum Software © phpBB Group https://www.phpbb.com/ |
|